Genotipificación del gen RHD en ADN fetal libre en plasma de embarazadas RhD negativo / Genotyping of the RHD gene in free fetal DNA in plasma of RhD negative pregnant women

Objetivo: Determinar el grupo RhD fetal a través del estudio del gen RHD en ADN fetal que se encuentra libre en plasma de embarazadas RhD negativo. Método: Se analizó la presencia de los genes RHD, SRY y BGLO en ADNfl obtenido de plasma de 51 embarazadas RhD negativo no sensibilizadas, utilizando una qPCR. Los resultados del estudio genético del gen RHD se compararon con el estudio del grupo sanguíneo RhD realizado por método serológico en muestras de sangre de cordón, y los resultados del estudio del gen SRY fueron cotejados con el sexo fetal determinado por ecografía. Se calcularon la sensibilidad, la especificidad, los valores predictivos y la capacidad discriminativa del método estandarizado. Resultados: El gen RHD estaba presente en el 72,5% de las muestras y el gen SRY en el 55,5%, coincidiendo en un 100% con los resultados del grupo RhD detectado en sangre de cordón y con el sexo fetal confirmado por ecografía, respectivamente. Conclusiones: Fue posible deducir el grupo sanguíneo RhD del feto mediante el estudio del ADN fetal que se encuentra libre en el plasma de embarazadas con un método molecular no invasivo desarrollado y validado para este fin. Este test no invasivo puede ser utilizado para tomar la decisión de administrar inmunoglobulina anti-D solo a embarazadas RhD negativo que portan un feto RhD positivo.

Objective: To determine the fetal RhD group through the study of the RHD gene in fetal DNA found free in plasma of RhD negative pregnant women. Method: The presence of the RHD, SRY and BGLO genes in fetal DNA obtained from plasma of 51 non-sensitized RhD negative pregnant women was analyzed using qPCR. The results of the genetic study of the RHD gene were compared with the RhD blood group study performed by serological method in cord blood samples, and the results of the SRY gene study were compared with the fetal sex determined by ultrasound. Sensitivity, specificity, predictive values and discriminative capacity of the standardized method were calculated. Results: The RHD gene was present in 72.5% of the samples and the SRY gene in 55.5%, coinciding 100% with the results of the RhD group detected in cord blood, and with the fetal sex confirmed by ultrasound, respectively. Conclusions: It was possible to deduce the RhD blood group of the fetus through the study of fetal DNA found free in the plasma of pregnant women with a non-invasive molecular method developed and validated for this purpose. This non-invasive test can be used to make the decision to administer anti-D immunoglobulin only to RhD-negative pregnant women carrying an RhD-positive fetus.

Análise do perfil de Rh e Kell em doadores de sangue em Porto Alegre, Rio Grande do Sul / Phenotypic profile analysis of Rh and Kell blood group systems among donors in Porto Alegre, Rio Grande do Sul

Introdução: A hemoterapia é uma prática terapêutica pelo meio de transfusão sanguínea. Devido ao baixo estoque de bolsas de sangue e o aumento de pacientes crônicos e emergenciais, se faz necessária a realização de testes imuno-hematológicos para minimizar os riscos de reações transfusionais e aloimunizações em doadores e receptores de sangue. Deste modo, no estudo foi avaliada a prevalência dos antígenos dos sistemas Rh e Kell em doadores de sangue de Porto Alegre ­ RS.Métodos: Estudo quantitativo, transversal e retrospectivo que foi realizado através da análise das informações dos doadores de sangue contidas no banco de dados do Hemocentro do Estado do Rio Grande do Sul, nos anos de 2018 e 2019.Resultados: Das 6.479 amostras fenotipadas, quanto ao sistema Rh, 44,6% são Rh positivo e 55,4% são Rh negativo. As frequências dos antígenos encontradas foram de, CC 10,1%, Cc 27%, cc 62,9%, EE 1,2%, Ee 13,9%, ee 84,9%. E, para o sistema Kell, K1 positivo 7,1% e K1 negativo 92,9%.Conclusões: Antígenos do sistema Rh e Kell exibem um grande nível de imunogenicidade e uma forte ligação com a Doença Hemolítica do Recém-nascido, podendo ocorrer a sensibilização em pacientes caso não haja a compatibilidade sanguínea. Este estudo ressalta a importância da implementação da fenotipagem eritrocitária em doadores de sangue, sugere-se mais estudos com períodos distintos para a pesquisa de resultados satisfatórios.

Introduction: Hemotherapy is a therapeutic practice consisting of blood transfusion. Low blood supply and an increase in chronic and emergency patients have made it necessary to conduct immunohematology tests to minimize the risks of adverse reactions and alloimmunization in donors and recipients. Therefore, this study aimed to assess the prevalence of Rh and Kell blood group antigens among blood donors in Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil.Methods: We conducted a quantitative, cross-sectional, retrospective study. Information from blood donors included in the Rio Grande do Sul's Blood Center database from 2018 to 2019 were analyzed.Results: A total of 6,479 samples were phenotyped, of which 44.6% were Rh-positive and 55.4% were Rh-negative. Antigen prevalence was CC (10.1%), Cc (27%), cc (62.9%), EE (1.2%), Ee (13.9%), and ee (84.9%). As for the Kell group, 7.1% were K1-positive and 92.9% were K1-negative.Conclusions: The Rh and Kell antigens are highly immunogenic and have a strong link with the hemolytic disease of the newborn. Sensitization may occur in patients if there is no blood compatibility. This study highlights the importance of implementing erythrocyte phenotyping in blood donors. Further studies should be conducted in different time frames to achieve satisfactory results.

Sistema Rh-Hr y variantes del antígeno D en tres poblaciones afroecuatorianas del Valle del Chota / Rh-Hr system and D antigen variants in three Afro-Ecuadorian populations in the Chota Valley / Sistema Rh-Hr e variantes do antígeno D em três populações afro-equatorianas no vale do Chota

Resumen La identificación inequívoca del antígeno D en medicina transfusional es de vital importancia para evitar reacciones postransfusionales y la enfermedad hemolítica del recién nacido. Es común el uso de reactivos serológicos monoclonales o tarjetas de gel y su interpretación está definida por cruces, de acuerdo con la reacción serológica. El propósito de este estudio fue determinar la frecuencia del factor Rh y las variantes del antígeno D en una población afroecuatoriana. Se trató de un estudio descriptivo, transversal con muestreo aleatorio simple de 541 pobladores. Para la tipificación del factor Rh se utilizó la metodología en tubo con antisueros monoclonales y para la detección de las variantes de D se utilizaron tarjetas de gel IDCoombs Anti-IgG. Las lecturas se verificaron mediante el análisis del índice kappa. Se aplicó estadística descriptiva y el análisis de Chi cuadrado para establecer la relación de las variables y su significación. Se identificó una frecuencia del 92% de individuos Rh(D) positivo y un 8% Rh(D) negativo. El 4,80% de los individuos presentaban la variante D débil y el 79% reacciones serológicas entre 2 y 3(+) indicativas de otras variantes del antígeno D. El fenotipo más común fue el R0/R0. Estos datos demuestran la necesidad de confirmar la existencia de variantes del antígeno D en esta población para un mejor manejo de la sangre. Una limitante constituye la disponibilidad de técnicas moleculares para la genotipificación de D; sin embargo, se podría implementar la fenotipificación RHCE como estrategia pretransfusional.

Abstract The unequivocal identification of D antigen in transfusion medicine is of vital importance to avoid post-transfusion reactions and hemolytic disease of the newborn. The use of monoclonal serological reagents or gel cards is common and their interpretation is defined according to the serological reaction by crosses. The purpose of this study was to determine the frequency of Rh factor and D antigen variants in the Afro-Ecuadorian population. This was a descriptive, cross-sectional study with simple random sampling of 541 residents. Tube typing with monoclonal antisera was used to typify Rh factor and ID-Coombs Anti-IgG gel cards were used to detect D variants, and the readings were verified by analysis of the kappa index. Descriptive statistics and Chi-square analysis were applied for the relationship of the variables and their significance. A frequency of 92% of Rh(D) positive individuals and 8% Rh(D) negative individuals were identified. Almost 5% (4.80%) of the individuals presented the weak D variant and 79% serological reactions between 2-3(+) indicative of other D antigen variants, the most common phenotype being R0/R0. These data demonstrate the need to confirm the existence of D antigen variants in this population for better management and availability of blood. A limitation is the availability of molecular techniques for D genotyping, however, RHCE phenotyping could be implemented as a pretransfusion strategy.

Resumo A identificação inequívoca do antígeno D na medicina transfusional é de vital importância para evitar reações pós-transfusionais e a doença hemolítica do recém-nascido. É comum o uso de reagentes sorológicos monoclonais ou cartões de gel e sua interpretação é definida por cruzamentos de acordo com a reação sorológica. O objetivo deste estudo foi determinar a frequência do fator Rh e as variantes do antígeno D numa população afro-equatoriana. Foi um estudo descritivo, transversal, com amostragem aleatória simples de 541 residentes. Para a tipagem do fator Rh foi utilizada a metodologia em tubo com anti-soros monoclonais e para a detecção das variantes de D, os cartões de gel ID-Coombs Anti-IgG. As leituras foram verificadas por análise do índice kappa. Foi aplicada estatística descritiva e para estabelecer a relação das variáveis e sua significação se utilizou a análise do qui-quadrado. Identificando uma frequência de 92% dos indivíduos Rh (D) positivos e 8% Rh (D) negativos. 4,80% dos indivíduos apresentavam a variante D fraca e 79% reações sorológicas entre 2 e 3(+) indicativas de outras variantes do antígeno D, sendo o fenótipo mais comum o R0/R0. Esses dados demonstram a necessidade de confirmar a existência de variantes do antígeno D nessa população para melhor gerenciamento e disponibilidade de sangue. Uma limitação é a disponibilidade de técnicas moleculares para a genotipagem de D, no entanto, a fenotipagem de RHCE poderia ser implementada como uma estratégia de pré-transfusão.

Frecuencia de antígenos del sistema sanguíneo Rh y del sistema Kell en donantes de sangre / Frequency of antigens in Rh and Kell blood system in blood donors

Introducción: los estudios inmunohematológicos que se realizan a los donantes de sangre se orientan a proporcionar al receptor una terapia transfusional compatible con el sistema sanguíneo ABO y antígeno D del sistema Rh. Sin embargo, como una forma de incrementar la seguridad transfusional, surge el interés de ampliar la gama de antígenos a determinar y por ende, a compatibilizar previo a una transfusión sanguínea. Objetivo: determinar la frecuencia de los cinco antígenos mayores del sistema Rh y los antígenos K1 y K2 del sistema Kell en donantes voluntarios de sangre. Métodos: Estudio descriptivo transversal que incluyó 200 donantes voluntarios de sangre del Centro Productivo Regional de Sangre del Maule (CPRSM) seleccionados al azar. Se realizó fenotipificación de los cinco antígenos mayores del sistema Rh. y el antígeno K1 y K2 del sistema Kell. Se utilizó la técnica de hemaglutinación en tubo, con sueros monoespecíficos y DG Gel® Coombs. Se calculó la frecuencia fenotípica de los antígenos D, C, c, E y e del sistema Rh., y K1 y K2 del sistema Kell, en porcentajes. A partir de la frecuencia de los fenotipos Rh. se determinó la frecuencia del genotipo más probable de dicho sistema. Para el Kell se estimó el genotipo en base al fenotipo. Resultados: sistema Rh: 96 por ciento de las muestras estudiadas presentaba el antígeno D, 97,5 por ciento el antígeno e; 35,5 por ciento el antígeno E; 79 por ciento el antígeno C y 65,5 por ciento el antígeno c. El genotipo más frecuente fue CDe/CDe. Sistema Kell: se encontró una frecuencia del 4 por ciento para el antígeno K1, mientras que el antígeno K2 presenta una frecuencia del 99,5 por ciento. Al nivel de frecuencia genotípica se detectó que el 96 por ciento de la población tiene un genotipo homocigoto para K2 (kk). Conclusiones: La frecuencias de los siete antígenos estudiados es similar a la descrita en otras poblaciones(AU)

Introduction: Immunologic studies performed on blood donors are directed to provide a transfusion therapy compatible with ABO blood group system and Rh system D antigen in the recipient. However, as a way to increase transfusion safety, the interest of expanding the range of antigens to determine and therefore to be tested for compatibility prior to a blood transfusion, arises. Aim: To determine the frequency of the five major antigens of Rh. system and K1 and K2 antigens of the Kell system in blood donors. Methods: Cross-sectional study including 200 randomly selected voluntary blood donors from Centro Productivo Regional de Sangre del Maule (CPRSM). Phenotyping of five major antigens of Rh. system and K1 and K2 Kell system antigens was carried out. The tube hemagglutination technique with monospecific Coombs sera and DG Gel ® was used. The Rh. system D, C, c, E, e antigens and Kell system K1 and K2 antigen phenotypic frequencies were calculated in percentages. The most likely Rh.genotype was determined from the phenotype frequency of this system. Similarly, in Kell system the genotype frequency was determined based on phenotype. Results: In the Rh.system, 96 percent of the samples studied had D antigen; 97.5 percent had the e antigen, and 35.5 percent the E antigen. Antigen C was present in 79 percent and c in 65.5 percent. The most frequent Rh. genotype was CDe/CDe. In Kell system, K1 antigen presented a frequency of 4 percent, while antigen K2 presented a 99.5 percent. Regarding genotypic frequency, a 96 percent of the population showed a K2 (kk) homozygous genotype(AU) Conclusion: The frequency of the seven antigens studied is similar to that described in other populations(AU)

Rh Blood Grouping of the Individuals Born of Rh Negative Mother and Rh Positive Biological Father.

Unlike ABO antigens, Rh antigens are present only on Red Blood Cells (RBC), RhO(D) antigen is clinically the most important in the Rh system because it is highly antigenic. In India, as reported, 95% population is Rh positive whereas 05% is Rh Negative(approximately). Rh antibodies are the major cause3 of haemolytic disease of newborn (HDN) and lead to destruction of transfused Rh Positive red cells. A total number of 799 pregnant mothers having RhD Negative Blood Group (and also their husband possessing RhD Positive Blood Group) were surveyed. Out of the 799 babies born, 662 possessed RhD Positive and 137 possessed RhD Negative Blood Group. Besides this, twin babies born of RhD Negative mother and RhD Positive Biological Father were computed separately (Total No.of such mothers being 12). In case of twin delivery, the twins babies all possessed RhD Positive Blood Group. Calculation shows that about 17% of babies were RhD Negative and 83% were RhD Positive.

Economic and Workflow Analysis of a Blood Bank Automated System

BACKGROUND: This study compared the estimated costs and times required for ABO/Rh(D) typing and unexpected antibody screening using an automated system and manual methods. METHODS: The total cost included direct and labor costs. Labor costs were calculated on the basis of the average operator salaries and unit values (minutes), which was the hands-on time required to test one sample. To estimate unit values, workflows were recorded on video, and the time required for each process was analyzed separately. RESULTS: The unit values of ABO/Rh(D) typing using the manual method were 5.65 and 8.1 min during regular and unsocial working hours, respectively. The unit value was less than 3.5 min when several samples were tested simultaneously. The unit value for unexpected antibody screening was 2.6 min. The unit values using the automated method for ABO/Rh(D) typing, unexpected antibody screening, and both simultaneously were all 1.5 min. The total cost of ABO/Rh(D) typing of only one sample using the automated analyzer was lower than that of testing only one sample using the manual technique but higher than that of testing several samples simultaneously. The total cost of unexpected antibody screening using an automated analyzer was less than that using the manual method. CONCLUSIONS: ABO/Rh(D) typing using an automated analyzer incurs a lower unit value and cost than that using the manual technique when only one sample is tested at a time. Unexpected antibody screening using an automated analyzer always incurs a lower unit value and cost than that using the manual technique.

Evaluation of Two Automated Instruments for Pre-transfusion Testing: AutoVue Innova and Techno TwinStation / 대한진단검사의학회지

BACKGROUND: Despite the advances in total laboratory automation, a considerable amount of work in blood banks is still done using outdated manual methods. Some automated pre-transfusion testing instruments have recently been developed. Of these, we evaluated and compared the AutoVue Innova (Ortho, USA) and the Techno TwinStation (DiaMed AG, Switzerland). METHODS: Forward and reverse ABO/Rh typing and unexpected antibody screening and identification tests were performed on 4,628 samples using the manual method and the two automated instruments. Two different anticoagulants (EDTA and citrate) were compared in ABO/Rh typing and unexpected antibody screening tests. Titrating studies were conducted on the following 7 dilutions using 5 samples of irregular antibodies with anti-E, anti-E & -c, anti-D, and anti-Le(a) with anti-Fy(a): 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, and 1:128. The test throughput per hour, the time required to perform 1 and 100 tests, and a simulation test for total events occurring in 1 day were also measured. RESULTS: No erroneous results were reported between the two instruments and the manual method. Discrepancies observed in 10 cases (0.4%) of ABO/Rh typing were of higher intensity with AutoVue Innova than with the manual method. AutoVue Innova exhibited the highest sensitivity in the titrating study and throughput performance compared with the manual method and the Techno TwinStation. Especially in the throughput and time required to complete 100 antibody screening tests, AutoVue Innova had a 3.3- and 3.5-fold higher performance, respectively, than Techno TwinStation. CONCLUSIONS: Because both of the two fully automated instruments (AutoVue Innova and Techno TwinStation) had high levels of accuracy and performance, it is expected that use of fully automated instruments will reduce human labor, turnaround time, and operator error in the blood bank.

Fetal rhd genotyping from maternal plasma in a population with a highly diverse ethnic background

OBJETIVO: Avaliar o desempenho da reação em cadeia da polimerase (PCR) em gel (convencional) como método diagnóstico não-invasivo para a genotipagem RHD fetal, por meio da análise do plasma materno. MÉTODOS: Foi conduzido um estudo de validação de teste diagnóstico a partir de 81 amostras sangüíneas obtidas de gestantes brasileiras RhD-negativo, entre 4 e 41 semanas de gestação. As regiões exon 10 e intron 4 do gene RHD foram testadas por meio da reação em cadeia da polimerase alelo-específica (AS-PCR) convencional. Os resultados da genotipagem fetal foram comparados com a tipagem sangüínea convencional no período neonatal. RESULTADOS: Quinze amostras foram obtidas no primeiro trimestre, 37 no segundo trimestre e 29 no terceiro trimestre. Houve falha de amplificação em 6 amostras. A concordância entre os resultados da genotipagem e da tipagem neonatal foi de 97,3%, sensibilidade de 98,3% e especificidade de 93,8%.CONCLUSÃO: AS-PCR convencional é um método com bom desempenho para a genotipagem RHD fetal por meio da análise do plasma materno, mesmo em uma população com alto grau de miscigenação.

Acurácia da avaliação dopplervelocimétrica da velocidade máxima do pico sistólico da artéria cerebral média na detecção da anemia fetal na doença hemolítica perinatal: uma revisão sistemática / Dopplervelocimetric evaluation accuracy of systolic peak maximum velocity of medium cerebral arteria in fetal anemia

O contexto do estudo é a predição da anemia fetal em gestantes portadoras da doença hemolítica perinatal e tem como objetivo avaliar a acurácia da medida dopplervelocimétrica da velocidade máxima do pico sistólico da artéria cerebral média na detecção da anemia fetal na doença hemolítica perinatal. A identificação dos estudos foi realizada com a adoção de bancos de dados gerais (MEDLINE e LILACS) e a partir de referências bibliográficas de outros autores. Osestudos selecionados tinham como critérios serem do tipo observacionais, com gestantes apresentando coombs indireto maior do que 1:8, técnica de insonação dovaso adequada, Vmax-ACM ≥ 1,5MOM, presença obrigatória de comparação com o padrão-ouro (hemoglobina fetal e/ou neonatal), e nível de evidência diagnóstica acima ou igual a 4. Os dados dos estudos selecionados foram alocados em tabelas 2x2 comparando o resultado do teste com o padrão-ouro. A acurácia diagnóstica foiexpressa principalmente através da razão de verossimilhança. A revisão incluiu onze estudos, com uma amostra total de 688. Três estudos apresentaram delineamento do tipo prospectivo e nível de evidência diagnóstica categoria 1. A performance do teste em questão apresentou variação razoável. O estudo de Mari et al (2000) foi considerado o de melhor qualidade metodológica, apresentando uma RV(+) de 8,45 e uma RV(-) de 0,02. A medida do doppler da Vmax da ACM como preditor da anemia fetal na doença hemolítica perinatal está consolidada. Porém, alguns pontos precisam ser melhor esclarecidos, como o intervalo ideal dos exames em casos graves e a validade do método em fetos que já foram submetidos a transfusões intra-uterinas

Profilaxis de la sensibilización Rh por transfución de plaquetas en pacientes Rh negativos / Prophylaxis of the sensibilization Rh by plaquet transfusion in negative Rh patients

La transfusión de componentes plasmáticos y celulares de la sangre es vital en numerosas situaciones clínicas; lo que, aunado a su constante escasez, obliga al clínico a recurrir a prácticas que pudiesen traeer alugna complicación posterior para el paciente. La transfusión de concentrados de plaquetas de donadores Rh positivos a pacientes Rh negativos, conlleva un riesgo de sensibilización a los antígenos Rh eritrocitarios, descrito hasta en un 19 por ciento. Las recomendaciones proponen el uso de la inmunoglobolina ant-Rh (D) preferiblemente por vía intravenosa, en mujeres Rh negativas aún antes de la edad fértil, tras la transfusión de componentes sanguíneos (plaquetas) de donadores Rh positivos. Nuestro objetivo es ofrecer una revisión de la información científica sobre el tema, con el fin de brindar elementos objetivos para mejor proceder ante la transfusión de plaquetas minimizar la sensibilización de los pacientes Rh negativos. Palabras clave: inmunoglobulina, plaquetas, Rh negativo, anticuerpos, transfusión, sensibilización.

Optimización y validación de un método de Elisa en tubo para la determinación de la potencia de preparados de inmunoglobulina Anti-D / ELISA in tube to determine potency of anti-D immunoglobuline

La cuantificación de la potencia en preparaciones de inmunoglobulina anti-D (Ig anti-D) requiere de metodologías costosas y de difícil ejecución, como lo es el método de hemaglutinación automatizado. Ante la necesidad de implementar métodos alternativos, se optimizó y validó un enzimoinmunoanálisis (ELISA) competitivo, utilizando tubos de poliestireno como fase sólida. El método consistió en: a) adsorción de glóbulos rojos grupo 0 Rh positivo (fenotipo R1R1) a la fase sólida; b) reacción competitiva de, cantidades variables de Ig anti-D no marcada (muestra de anti-D o preparación de referencia) y de una cantidad constante del Ac monoclonal biotinilado (Brad-5 biotinilado), por los sitios de unión D de los góbulos rojos; c) revelado de la unión del Brad-5 mediante el conjugado extravidina/fosfatasa alcalina; d) punto final con OHNa 3M; e) lectura de absorbancia a 405nm. La potencia relativa de la muestra problema respecto del estándar se determinó mediante el modelo estadístico de líneas paralelas. Resultados: la validación arrojó los siguientes resultados: rango lineal entre 0.094 y 1.5 ug/ml con un coeficiente de correlación (R²) de 0.99, precisión intermedia entre 5.7 y 28.1 (CV por ciento), repetibilidad entre 1.6 y 15.8 (CV por ciento) y una recuperación del 100 por ciento (entre 90 y 110 por ciento). Los controles de especificidad fueron satisfactorios. Según los resultados obtenidos, el método de ELISA descripto puede ser utilizado para la determinación de la potencia en preparaciones de Ig anti-D como así también en pooles de plasma y semielaborados. Por su robustez y fácil implementación es un método aplicable en laboratorios de baja complejidad.

Incidencia de fenotipos D débiles y D parciales en donantes de sangre de Guanabacoa / Incidence of weak and partial D phenotypes in blood donors from Guanabacoa

Se determinó la incidencia de fenotipos D débiles y D parciales en 4 339 donantes del Banco de Sangre de Guanabacoa. La muestra consistió en 2 508 individuos blancos y 1 831 no blancos. La tipificación Rh (D) de la sangre se realizó con un anti-D policlonal (MediCuba) y a las células Rho negativas se les determinó el fenotipo D en la prueba de antiglobulina indirecta. Los hematíes D se clasificaron en D débiles y D parciales con el empleo de un papel de anticuerpos monoclonales (BPL) mediante las técnicas de aglutinación en salina y en papaína. La frecuencia de fenotipos D débiles en blancos fue del 0,11 porciento y no se encontraron variantes D en este grupo. En los no blancos la frecuencia de D fue del 0,43 pociento y la de D parciales fue del 0,16 porciento; 2 individuos pertenecían a la categoría DIVb y otro a la Div. La incidencia de fenotipos D débiles fue mayor en donantes no blancos y en este grupo se encontraron las variantes D, en específicos Div, con una frecuencia más elevada que la encontrada en otros países para la categoría Dvi que es la más común en poblaciones caucásicas con una frecuencia de 0,02-0,05 porciento